叶绿素中黄色素和绿色素分离的原理

方法 ：
1、纸层析法分离叶绿体色素（方法1）（1） 称取新鲜叶片（木茨、菜心、菠菜等叶均可）1克，剪碎，放在研钵中，加乙醇5m1，共研磨成匀浆，静置5分钟。（2） 用滴管吸取上面的色素提取液4～5滴。一滴一滴地滴在滤纸的中央（滤纸要平放在表面皿或培养皿上）。待色素点风干后，向该色素点上慢慢滴加汽油，使四种色素（叶绿素a、叶绿素b、叶黄素、胡萝卜素）在滤纸上分离出来，四种色素在滤纸上的移动速度是胡萝卜素（橙黄色）>叶黄素（黄色）>叶绿素a(蓝绿色)>叶绿素b（黄绿色）。
2、纸层析法分离叶绿体色素（方法2） （1） 称2克新鲜绿色叶片，剪碎，放在研钵中，加入5ml乙醇，共研磨成匀浆，过滤，该滤液即为色素提取液。（2）取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将它剪成长约10cm ，宽约1cm的滤纸条。（3）用毛细管吸取色素提取液。在滤纸条的一端（约距这一端的1cm处）划出一条滤液细线，等滤液干燥后，再重复划4～5次。（4）将滤纸条的另一端（约距这一端1cm处）拆成“V”字形，并将它挂在放有层析液的烧杯壁上（注意：色素线要略高于层析液面，且滤纸条下端最好不要碰到烧杯壁），盖上培养皿。（5）经几分钟后，观察色素带的分布，最上端为胡萝卜素，其次是叶黄素，再次是叶绿素a，最后是叶绿素b。
3、叶绿体色素的性质鉴定（1）叶绿体色素的提取取菠菜（或其他植物）叶子2g，加石英砂和碳酸钙少许，乙醇约5ml，研磨成匀浆，再加乙醇15ml，用漏斗过滤，即为色素提取液。（2）叶绿素的荧光现象取上述色素乙醇提取液少许于试管中，在反射光和透射光下观察色素提取液的颜色有什么不同。反射光下观察到的溶液颜色，即为叶绿素产生的荧光现象。（3）光对叶绿素的破坏作用取上述色素乙醇提取液少许，分装在2支试管中，1支试管放在暗处（或用黑纸包裹），另1支试管放在强光下（太阳光），经2—3小时后，观察两支试管中溶液的颜色有何不同？（4）铜在叶绿素分子中的替代作用取上述色素乙醇提取液少许于试管中，1滴1滴地加入盐酸，直至溶液出现褐绿色，此时叶绿素分子已遭破坏，形成去镁叶绿素。然后加醋酸铜晶体1小粒，慢慢地在酒精灯上加热溶液，使溶液又产生亮绿色，此即表明铜已在叶绿素分子中替代了原来镁的位置。（5）黄色素和绿色素的分离将叶绿体色素的酒精提取液10毫升倒入分液漏斗中，倾斜漏