内参β-actin

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/30 16:14:55
我做western blotting要用β-actin做内参，若其一抗与目的蛋白（fas-26kD,bcl-2:43KD,p53-53kD）的一抗不能一起加，该如何进行内参的检测？麻烦给个具体步骤.(我看过说是可在目的蛋白进行一抗，二抗孵育，染色，观察等完了后，用“strip液”洗膜，在进行内参的一抗，二抗孵育，染色，观察等，这“strip液”是什么？如何配制？这种方法可行吗？)

这个方法可行。
strip的意思就是去掉先前用的probe的意思
配方如下，很好用：
Stripping solution:

100 mM 2 Mercaptoethanol: 104 ul of 14.2 M solution
2% SDS: 20 mls of 10%
62.5 mM Tris Hcl (pH 6.8): 6.25 ml of 1M Tris

qs to 100 ml with ddH20

Strip at 60 for 30 mins or 70 for 15 mis