UC知道总氮 紫外分光光度法测定时空白偏高
来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/07/02 14:38:00
1）4克过硫酸钾+1.5克氢氧化钠，配置成100ml
2)20ml浓盐酸稀释到200ml
121度，消解30分钟。
我将蒸馏水+1ml配制的盐酸溶液定容到25ml,在220纳米测定吸光度是0.008.将问题空白稀释10倍，吸光度是0.052，说明仪器正常，测定前也预热过1小时。为了保险，我在技术指导的监督下再做了一次，结果还是这样的。后来怀疑是新买的过硫酸钾的问题，重新买了试剂，是上海的，和最早的厂家一样。请问大家有什么经验指导？
1.我的比色皿是石英的，厂家配套的
2.空白加入10毫升蒸馏水，5毫升碱性过硫酸钾，121度，消解30分钟，冷却到室温，加入1毫升1+9盐酸，定容到25毫升。220/275纳米测定
1. How do you prepare your blank?
2. what is the material of your 比色皿?
Answer:
这半年测总氮感觉挺有收获 基本把问题弄清楚了 所以也来分享一下
1、过硫酸钾提纯
我觉得这个方法测总氮的主要问题就是过硫酸钾含氮 去年我测试的时候，吸光度甚至达到了4 -_-|| 现在想想真是太恐怖了
听说国外的过硫酸钾没问题 但是实在太贵，另外我也不是完全确定肯定是过硫酸钾的问题，所以我选择重结晶提纯过硫酸钾
提纯过程：在1升广口瓶加入约800mL水，50摄氏度水浴锅加热，然后逐渐加入过硫酸钾，直至不能溶解为止，这个过程挺漫长-_-||
然后把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却（选用广口瓶有盖，重结晶过程避免引入其他污染），再放进四度冰箱重结晶，建议同时用另一个广口瓶冰一瓶去离子水，重结晶一夜后，倒掉上清液然后用冰好的去离子水清洗几遍，我觉得这样效果更好（重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底，但其实结构很松散，用钢勺什么的弄两下就离散开了，然后再清洗）。我一般都重结晶两次。
洗净后倒掉上清液，然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢，可以转移到烧杯）。
上次结晶了约170克回收了约60克，还比较满意，比买国外的便宜多了！
2、其他药品
去年有大人说氢氧化钠以及盐酸都有影响，但是我都是用的一般分析纯药品，没有造成特别大的影响，应该没问题。
3、消解过程
我选择消解温度为124摄氏度左右，有大人说要避免跟生物实验室公用灭菌锅，会混入污染，不过遗憾的是我们实验室就是生物实验室-_-|| 但是我这半年做的基本没啥问题，消解的时候比色管盖严，用布和绳子把盖子扎严实，基本问题不大。
4、测试
测试的时候要加入1ml 1:9盐酸，我觉得盐酸跟过硫酸钾的反应可能需要一段时间，所以我都是加入盐酸后过几个小时再测试，结果很稳定。
5、结果
现在测试的空白220与275相减后基本都在0.01-0.02（220在0.04 275在0.01左右），对于我的实验精度已经足够了，标准曲线r=0.9997，不算特别好