600bp的DNA大概要配多少浓度的胶跑电泳

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/09/28 15:28:29
我拿到上海生工去测序说有重叠峰，打算跑高浓度电泳，但不知道应该如何控制胶的浓度和电泳电压时间。。。。希望有经验的人给个参考。。谢谢

我跑过700bp的电泳，用1.5%-2%的胶都是可以的。
电压在120-130V之间，大致时间在30-40分钟。根据你们不同电泳仪的设置，可以观察溴酚兰条带来判断时间。一般溴酚兰接近胶的末端时，就可以了。

另外，有重叠峰的原因比较多。DNA测序可以选择让生工给你做纯化，这样好些。以前我自己纯化的DNA也没有测出。如果还是测序失败，说明DNA有问题。（比如说做的是随机突变的PCR，那么是不可能测出来的）

1%~1.5%的琼脂糖都可以
不同的电泳仪设置不一样
一般150V，或者100v/50mA
时间40~50分钟
跑胶分离后要纯化

个人经验，小于1kb的片段我一般用1.2%的胶，可以良好分离。电泳120V，40分钟。我用的电泳槽较大，大约20多厘米。电压也就是4~5V每厘米。你可以试试。