酶对水透析,酶活性丧失的原因

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/30 08:52:07
有的说是辅因子被透析掉了,有的说是低离子浓度使酶变性了,究竟是什么原因,用什么试验方法可以验证?
有时候酶的辅因子就是金属离子,如果加入辅因子(金属离子),那么就不好区分了啊,用EDTA螯合,也会因为这个原因无法得出答案啊~

我不是很理解离子强度的概念,对离子强度的理解是:只要是离子,无论是什么样的离子,都可以提升离子强度吗?离子强度与离子种类无关吗?

原因:
  向透析后的酶加入辅助因子,观察酶活是否可以恢复。用以EDTA螯合金属离子的酶做为对照。第二可以加入非辅助因子的离子来增加离子强度,观察酶活是否恢复。
辅助因子是金属离子的情况。用EDTA做对照就是人工降低离子浓度。然后向实验组和对照组都加入金属离子,看功能是否可以恢复。如果两组都能恢复,说明的确是由于缺少金属离子造成酶活的丧失。

  酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量,或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。

  定义
  指酶催化一定化学反应的能力。

  单位
  在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量为一个活力单位(U)。温度规定为25度,其他条件取反应的最适条件。

  比活力
  每毫克酶蛋白所具有的酶活力。单位是u/mg。比活力越高则酶越纯。

  转化数
  每分子酶或每个酶活性中心在单位时间内能催化的底物分子数(TN)。相当于酶反应的速度常数kp。也称为催化常数(Kcat)。1/kp称为催化周期。碳酸酐酶是已知转换数最高的酶之一,高达36×106每分,催化周期为1.7微秒。

向透析后的酶加入辅助因子,观察酶活是否可以恢复。用以EDTA螯合金属离子的酶做为对照。第二可以加入非辅助因子的离子来增加离子强度,观察酶活是否恢复。

我说的就是辅助因子是金属离子的情况。用EDTA做对照就是人工降低离子浓度。然后向实验组和对照组都加入金属离子,看功能是否可以恢复。如果两组都能恢复,说明的确是由于缺少金属离子造成酶活的丧失。

离子强度就是指的是溶液中电解质多。离子强度和离子的摩尔数和一个离子所带的电荷有关,和种类无关。