20mM磷酸盐缓冲液的配制方法（破碎蛋白时用的）

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）

试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O

配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。

（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）

pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7 93.5 6.5

5.8 92.0 8.0

5.9 90.0 10.0

6.0 87.7 12.3

6.1 85.0 15.0

6.2 81.5 18.5

6.3 77.5