想用基因工程方法生产胰岛素,如何获得胰岛素基因

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/09/21 02:49:15
不是想直接购买。想要自己制备,或者说这是个实验的设想,怎样做才能达到获得胰岛素基因这个目的。需要详细的步骤

这个很复杂,人的基因是有内含子的,通过寻找人合成胰岛素的mRNA进行反转录相对比较容易获得目的基因,要是用氨基酸序列逆推人工合成就比较麻烦。
找到胰岛B细胞,然后自己找现成的mRNA,在反转录出DNA然后用扩增仪扩增,修饰后接合到运载体(质粒,含有标记基因,一般采用抗药性或抗生素基因做标记基因)上,注入微生物(大肠杆菌)当然是大量导入,然后选择培养基筛选。成功导入的微生物作为菌种,连续培养,取得产物。

人工合成基因法和直接分离基因法
用限制性内切酶从人的胰岛素基因上切,或使用胰岛素的mRNA逆转录,还可以用胰岛素的氨基酸序列反推

用限制性内切酶到人体内的DNA上去剪切。得到大量的胰岛素基因

然后用鸟枪法使该基因进入到微生物体内。再去发酵。

好像只能向生科所,或者医科大学科研室买吧,不太清楚,你GOOGLE搜搜看