SF9昆虫细胞的大小

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将圆环病毒2型的ORF2全基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac^TMI中，获得重组转移载体pFast-OFR2，再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中，发生转座作用，经蓝白茵落筛选得到含ORF2基因的重组穿梭栽体Bac．ORF2，以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染sf9细胞，获得重组病毒，命名为Ac．ORF2。间接免疫荧光分析表明，PCV2阳性血清能使Ac．ORF2感染的sf9昆虫细胞呈强的荧光着色；SDS-PAGE与Western-blotting分析可见大小约为28kD的特异性带，表明Ac．ORF2在sf9细胞中成功表达了PCV2 ORF2蛋白。将该表达蛋白纯化并经磷钨酸负染后，通过电镜观察可见形态与PCV2病毒粒子相似的病毒样颗粒（VLPs），其中某些颗粒由于中心浓染而似空衣壳，其直径也为17nm左右。