提DNA时碰到的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/29 02:56:54
请教大家,在提植物叶片DNA时,加苯酚-氯仿轻轻混匀颠倒15min,12000转离心20min后吸上清液时,为什么有的样品会吸到下面绿色的杂质?轻轻的吸也会吸上一点,不过大部分样品不会这样。
谢谢您的回答,可是我以前只是在普通离心机上离心,温度不可能低于4°,而且枪头打断也会吸到。

一、温度原因:一般我们要求是在4摄氏度进行离心,如果温度过低,会有这样的现象。
二、可将枪头剪去部分,这样就不会吸到下面的杂质了。

我不知道你的样品及24:1的苯酚-氯仿用量是多少,我做的时候很少有这样的情况(偶尔碰到过,用增加离心转速和时间的办法来解决的,不过你12000的转速和20min的时间已经是高强度的离心了)。
我建议你增加溶液的体积,这样吸取上清液时就可以保证其纯度。