关于生物技术的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/07/04 12:04:51
请解释一下PCR技术的原理。以及以下分子标记的原理:RFLP RAPD SSR ISSR AFLP SNP。 我看书了,但是觉得很抽象,看不懂。请用比较易懂的方法解释的下。谢咯

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的
寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增
形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引
物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶
序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制
链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又
可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟, 2~3小时就能将待扩目的基因扩增放
大几百万倍。(Plateau)。 到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。