亮蓝r-250测蛋白(急!)

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/07/04 18:06:21
能否用考马斯亮蓝R-250测定蛋白溶度?反应的时间应该是多长?测定的蛋白溶度的范围是多少?

可以。但R-250更常用于胶体考马斯亮蓝染色。
通常染色需2小时。λmax=560-590nm。
染色灵敏度比氨基黑高5倍。但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点。

考马斯亮蓝R-250通常用于蛋白电泳的染色。
一般用考马斯亮蓝G-250测定蛋白质浓度或含量,此为Bradford法,反应5 min后即可测定,1 h内稳定。测定波长通常为595nm,也可以自己扫描出最大波长。灵敏度在0~20 μg/mL范围内。一般分别以100 μg/mL和1000 μg/mL标准蛋白质溶液制作两条标准曲线,相应称做微量标准曲线和大量标准曲线。待测样品过浓时,可适当稀释。