我在滤纸上溶解了质粒后测浓度很低~怎么办?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/30 22:40:14
我融了大概200uL的DD水,OD很低~转化效率不够,怎么样才能200uL的水浓缩成10-20uL的体积左右呢?

还是用异丙醇沉淀吧 最简单了

低温减压蒸干。Eppendorf 的那个减压蒸干器就行。

http://www.eppendorf.cn/int/index.php?l=71&sitemap=2.1&pb=28b856e47d586ec9&action=products&contentid=1&catalognode=59966

用质粒纯化试剂盒。最后洗脱的时候用20μL水就行了。
或者有真空干燥器的话就不用搞什么试剂盒了,用下面这个方法
1.仪器用具:
a.桌上型离心机
b.真空干燥器
2.药品及试剂:
a.3 M sodium acetate (NaAc), pH 5.2
b.100% ethanol
c.TE buffer
3.方法步骤:
1)加入1/10体积的sodium acetate于DNA溶液中,使其最终浓度为0.3 M。
2)加入2.5倍体积100% Ethanol (EtOH)混合后,置于-20 中30~60分钟(若DNA小于1kb或量少于100 ng/ml,应把溶液放在-70 下2小时,若DNA小于200 bp时,加入10 mM MgCl2有助于DNA回收。)
3)12,000 rpm离心10分钟,倒掉上清液,置于真空干燥器10分钟。
4) 加50 μl TE buffer or water,再次悬浮DNA,保存样品DNA于4 。

最后定容的体积根据你需要自己看着办,像你就加20μL

那就将水的质量减低

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