生物提取叶绿素试验中层析液和酒精的作用有是什么分别？

（1）由于叶绿素和类胡萝卜素都是有机物，而层析液是有机溶剂，所以可以溶解这些色素，但是不同的色素在层析液中的溶解度不相同，所以随层析液在滤纸上的扩散速度也不同（溶解度大的扩散速度快），因此，不同的色素就在扩散时分离开来了。

结论：层析液的作用是溶解并分离不同色素。

分离的原理与四种色素在层析液中的溶解度有关。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，由于四种色素的化学组成和结构不同，因此每一种色素分子在层析液分子的作用下，克服色素分子之间的引力，向层析液中扩散的速度不同，即在层析液中的溶解度不同，因而四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同，其中胡萝卜素在层析液中的溶解度最高，扩散速度最快，其次是叶黄素、叶绿素a，叶绿素b溶解度最低，扩散得最慢。依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素在扩散中分离开来。

（2）酒精的作用
叶绿体中的色素溶解于有机溶剂如酒精或丙酮(相似相溶)，形成色素液。

①取材时要选取新鲜的颜色较深的叶片，是因为以便使滤液中含较多的色素；

②研磨时加入二氧化硅的目的是为了研磨得充分，更有效地破坏细胞结构；但由于二氧化硅是特别细的白色粉末，再加上控制不好用量，易过量，使滤液中含有较多的二氧化硅，而导致滤液颜色变浅。滤液中杂质越多，实验现象越不明显。有实验证明，改用白细河沙(洗净干燥后用)代替二氧化硅粉末，这样研磨更充分，滤液中减少了杂质的含量，颜色变得深绿，实验效果明显。

加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。因为叶绿素分子结构中含有一个镁原子，当细胞破裂时，细胞液内有机酸中的氢可取代镁原子而成为褐色的去镁叶绿素，碳酸钙可中和有机酸以防止去镁反应的发生。

③研磨要迅速、充分。这是因为一是因为丙酮容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素；三是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。

④制备滤纸条时，根据小孔(边缘)扩散原理，物质分子沿边缘扩散速度要大于里边扩散的速度，因此要将滤纸条的一端剪去两角，主要是为了延长边缘长度，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。

⑤画线时，一定要细并