请教分子细胞生物学问题，高手来

如果你的cdna片段较小，你可以用3楼的方法，将其插入PEGFP-N2载体，将其转入细胞，看看GFP的表达量，及其定位

如果片段较大，不宜插入载体的，用2楼的方法，取其特异性表达的一段序列插入载体，转入细胞表达

大体方法就是这样的，其他的细节还是多看看文献的额

希望有帮助

取cDNA序列中的一段，在适宜载体中表达出特异性肽段，用此肽段免疫小鼠，提取血清中的抗体，用荧光素标记后用免疫荧光定位蛋白。当然如果能得到商业化的单克隆抗体更好。
免疫荧光是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。
将cDNA连接进入带有GFP的质粒当中，注意连接进取的时候不要去掉cDNA上的引导肽。然后将质粒转入真核细胞。这样你的目的蛋白就会和GFP（绿色荧光蛋白）一同表达，并由其引导肽进行定位。然后通过confocal来观测荧光在细胞、组织上的定位就知道了。

参考资料：生命经纬

可以构建真核表达载体同时融合表达荧光蛋白，标记细胞器marker，然后通过激光共聚焦显微镜或（稍差）用荧光显微镜观察。就可以得到蛋白定位的情况。

当然如果有蛋白的抗体，用抗体作免疫组化或免疫荧光，同时双标marker，就能知道内源性蛋白定位。

将cDNA连接进入带有GFP的质粒当中，注意连接进取的时候不要去掉cDNA上的引导肽。然后将质粒转入真核细胞。这样你的目的蛋白就会和GFP（绿色荧光蛋白）一同表达，并由其引导肽进行定位。然后通过confocal来观测荧光在细胞、组织上的定位就知道了。

取cDNA序列中的一段，在适宜载体中表达出特异性肽段，用此肽段免疫小鼠，提取血清中的抗体，用荧光素标记后用免疫荧光定位蛋白。当然如果能得到商业化的单克隆抗体更好。
免疫荧光是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成