什么是杂交瘤？

杂交瘤技术的基本原理

一 单克隆抗体的制备

1975年kǒhler和milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞（srbc)免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个b细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗srbc的单克隆抗体（monlclonalantibody,mcab）。迄今世界已研制成数以千计的mcab。

单克隆抗体的理化性状高度均一，生物活性单一，与抗原结合的特异性强，便于人为处理和质量控制，并且来源容易，所以一问世便受到欢迎和重视。在医学领域中，mcab在诊断疾病、判断预后、防治疾病以及疾病机制研究等方面起着巨大的促进作用。为此，两位发明者于1984年获得诺贝尔医学奖。

第一节 杂交瘤技术的基本原理

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长（选择原理后见），小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。其原理从下列几个主要步骤阐明。

（一）细胞的选择与融合

建立杂交瘤技术的是制备对抗原特异的单克隆抗体，所以融合细胞一方必须选择经过抗原免疫的b细胞，通常来源于免疫动物的碑细胞。脾是b细胞聚集的重要场所，无论以何种免疫方式刺激，脾内皆会出现明显的抗体应答反应。融合细胞的另一方则是为了保持细胞融合后细胞的不断增殖，只有肿瘤细胞才具备这种特性。选择同一体系的细胞可增加融合的成功率。多发性骨髓瘤是b细胞系恶性肿瘤，所以是理想的脾细胞融合伴侣。目前常用的b细胞瘤株有：p3-x63-ag8(kǒhlerandmilstein，1975)，p3-nsi/1-ag4-1(kǒhlerandmilstein，1976)，x63-ag8.563(kearneyetal，1979)，sp2/0-ag14(schulmanetal，1978)等，这些细胞株皆为hat敏感细胞株。

使用细胞融合剂造成细胞膜一