杂交瘤细胞第一次筛选

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/07/07 02:15:24
资料上说 第一次筛选后 得到的细胞有三种
请问是用什么选择的 为什么是三种?

1.在HAT培养基[属于选择性培养基,含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡;未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。
2.仅仅就“两个细胞的融合”而言有三种,有“瘤-瘤”型融合细胞、“瘤-B”型融合细胞、“B-B”型融合细胞。(实际上,还有未融合细胞、三细胞融合....等)